Helicobacter pylori: обзор анализов, показания, правила подготовки

Что такое Helicobacter pylori?

Хеликобактер пилори (H. pylori или же Helicobacter pylori) – это спиралевидная грамотрицательная микроаэрофильная бактерия. Бактерия Helicobacter pylori является крайне опасным и в то же время самым распространенным патогеном человека, приводящим в случае инфицирования к развитию язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки, возможному развитию опухолевого процесса желудочно-кишечного тракта.

Источники и пути передачи Helicobacter pylori

Источником инфекции является инфицированный человек. Он может быть, как уже больным, так и бактерионосителем. Тем не менее бактерия Helicobacter pylori может быть обнаружена и у обезьян, и у кошек и у свиней, что подтверждает сложность локализации заболевания с учетом большого количества вариантов поступления возбудителя в организм теоретического больного.

Механизмом передачи возбудителя является фекально-оральный (нарушение первичной гигиены) и орально-оральный (саливационным путем), а пути передачи имеют большую разновидность: контактно-бытовой, алиментарный, ятрогенный, водный, артифицированный и даже через не прошедшие специальную обработку лабораторные инструменты (щипцы, эндоскопы и т.п.).

Зачем делать анализ на Helicobacter pylori?

Существование Хеликобактер пилори, который является болезнетворным агентом бактериальной природы, в больших количествах в просвете желудка и кишечника, указывает на озвученные выше заболевания, а иногда и становится триггером к их появлению и становлению. Своевременная диагностика и обнаружение Helicobacter pylori позволяет снизить шанс обострения и развития тяжелых патологических состояний, нивелируя возможные медикаментозные издержки и вред здоровью больного.

Показания для назначения анализов на Helicobacter pylori

Анализы на наличие Helicobacter pylori проводят в следующих случаях:

• После операции по резекции желудка по поводу рака желудка.
• При наличии неуточненной диспепсии ЖКТ.
• При наличии желания, волеизъявления и готовности, высказанной самим теоретически больным человеком сразу после соответствующих консультаций со своим лечащим врачом.
• В преддверии длительного курса терапии Аспирином, в случаи наличия у больного высокого риска развития язв и идущих с ними в связке патологических осложнений.
• В случае долгого применения Аспирина в малых поддерживающих дозах, и, при том, имеющиеся в анамнезе болезни желудочно-кишечного тракта, сопровождающиеся перфорацией стенок ЖКТ с последующим кровотечением.
• Наличие у больного ГЭБ (гастроэзофагеальной рефлюксной болезни), в связи с чем им необходим длительный прием ИПП (ингибиторов протонной помпы).
• В связи с профилактикой рака желудка и возможными предрасположенностями к канцерогенным заболеваниям ЖКТ.
• При обнаружении в анализах крови и гематограммах ярко выраженной (однако не имеющей особых причин) железодефицитной анемии и идиопатической тромбоцитопенической пурпуры, аутоиммунной тромбоцитопении.
• При наличии выраженного дефицита витамина В12.
• В случаи обнаружения язвы желудка, двенадцатиперстной кишки, а также их наличия в настоящее время или в прошлом времени, в случаи сопутствующих им осложнений или без них.
• Если обнаруживается наличие лимфомы в ее MALT разновидности, то есть при подтверждении ее связи со слизистой оболочкой желудка.
• В случае наличия кишечной метаплазии или атрофии слизистой оболочки желудка.
• При наличии генетических предрасположенностей в сфере канцерогенных новообразований желудочно-кишечного тракта. Подразумеваются, в первую очередь, прямые родственники (сестры, братья, отец, мать, дедушки и бабушки) в случае подтверждения у них в анамнезе рака желудка.
• В связи с обнаружением функциональной диспепсии в организме больного с характерной симптоматикой в виде вздутия, дискомфорта в эпигастральной области живота, которые возникают без особых причин или предпосылок, а также в виде приступов тяжести.
• Для снижения возможности образования кровотечений из верхних отделов желудочно-кишечного тракта, для снижения риска появления пептической язвы в случае лечения заболеваний при помощи НПВП (нестероидные противовоспалительные препараты). Нестероидные противовоспалительные препараты являются известными катализаторами лекарственных язв и гастритов, что коррелирует с тем, что чаще всего пациент принимает их долгое время, а иногда и пожизненно. Это не может не привести к повышенной опасности развития патологий, а связка Хеликобактер пилори с НПВП приводит к двойному риску образования соответствующих заболеваний.

Анализы для диагностики Helicobacter pylori

Для диагностики Хеликобактер пилори существует ряд процедур лабораторной диагностики. В основе своей данные методики возможно разделить на две обширные категории:

• инвазивные методы (то есть с прямым введением в организм человека особых инструментов, с использованием техники эзофагогастродуоденоскопии или «ЭФГДС», а также с изъятием гистологического материала и с дальнейшим использованием молекулярных и бактериологических методов в тандеме);
• неинвазивные методы (включающие в себя ряд методов без прямого вмешательства в организм человека посредством приборов или же инструментов).

К инвазивным методам относятся: быстрый уреазный тест, ПЦР (с выявлением Н. рylori в биоптате), культуральный метод, гистологический (цитологический) метод.

К неинвазивным методам относятся: уреазный дыхательный тест серологический метод (ИФА), ПЦР (выявление Н. рylori в кале).

Все методы диагностики Helicobacter pylori

• Быстрый уреазный тест (или БУТ) – основывается на способности Хеликобактер пилори воспроизводить фермент уреазу, в функции которого входит разрушение мочевины до аммиака и углекислого газа. В результате данной конверсии появляется аммиак, который ощелачивает среду, изменяя цвет индикатора с желтого на малиновый. Весь процесс происходит при взятии материала напрямую из желудка. Его помещают на индикаторную бумагу, в случаи положительного исхода теста – изменяется цвет.
• Уреазная проба с биоптатом слизистой оболочки (или же CLO-тест, Campylobacter-like organism test) – надежный и относительно простой вариант выявления Хеликобактер пилори. Схема его проста – биоптат располагается в среду, содержащую мочевину и индикатор феноловый красный. Положительный результат проявляется изменением окраски среды с желтой на красную в результате расщепления мочевины уреазой возбудителя и защелачивания среды образующимся аммиаком.
• Уреазный дыхательный тест (С-уреазный дыхательный тест, мочевинный дыхательный тест) – является золотым стандартом. Отличается своей максимальной объективностью, специфичностью и чувствительностью, приближающейся к 100%. Через 5 минут после приема 200 мл апельсинового или яблочного сока в специальный герметичный контейнер. Затем пациент выпивает приготовленный медицинским персоналом раствор с 13С- меченой мочевиной. В течение 30 минут пациент спокойно сидит в медицинском офисе, строго через 30 минут после приема раствора проводят сбор выдыхаемого воздуха во второй контейнер. В дальнейшем происходит оценка уреазного теста в пробах до и после приема раствора препарата (обозначается как DOB – Delta over Baseline, измеряется в промилле.
  • <3,0 – отрицательный тест;
  • 3,0-4,5 – сомнительный;
  • >4,5 – положительный.
• Анализ кала на антиген H. pylori – является неинвазивным, удобным, скорым и недорогим тестом, основанном на скором распознавании бактериального антигена в стуле. Для этого используется диагностика при помощи ПЦР и ИХМ. ПЦР основывается на выявлении в исследуемом материале фрагментов генома возбудителя, то есть генов уреазы – ure A, ure B, ure C.
• Культуральный метод – это метод, использующийся в специальных случаях, например для определения верного антибиотического препарата в ситуации, когда бактериальная культура Хеликобактер пилори проявляет свою резистентность по отношению к типичной антибиотикотерапии рядовыми препаратами. В качестве питательной среды используются плотные среды с наличием сыворотки крови или обычной крови. Инкубация происходит при 37 градусах С в условиях азота и углекислого газа.
• Цитологический метод – является общепринятым «золотым стандартом» диагностики Helicobacter pylori. Цитологический метод – это самый популярный и распространенный методы определения из мазков-отпечатков при проведении ФГДС.
• Одним из его неоспоримых плюсов является возможность визуализации бактерий в биоптатах посредством особого окрашивания исследуемого материала при помощи гематоксилина и эозина, с помощью серебросодержащих красителей, толуидинового синего, карболового фуксина, по Романовскому-Гимзе.
• Серологический метод, ИФА для определения антител IgG, IgM, IgA к H. pylori в сыворотке крови. Состоит из обнаружения специфических циркулирующих антител в крови к H. pylori с помощью иммуноферментного анализа.
• Биопсия – инвазивный метод исследования, диагностирующий инфекцию Helicobacter pylori. Он считается наиболее надежным, поскольку обеспечивает точность в 100% случаев при определении наличия или отсутствия бактерии. Он основан на взятии образцов эпителия желудка во время гастроскопии, после чего биоматериал направляется в лабораторию для проведения бактериологического и гистологического анализа. Результаты бактериологического исследования обычно доступны через 12 суток после выполнения биопсии. Этот метод позволяет не только подтвердить наличие инфекции, но и оценить степень колонизации стенок желудка бактерией.

Какой тест на Хеликобактер является самым лучшим и достоверным?

Для начальной диагностики и оценки эффективности терапии рекомендуется проведение дыхательного теста с мочевиной. Он является золотым стандартом на первом этапе исследования и признан одним из наиболее точных методов оценки эффективности лечения инфекции Helicobacter pylori.

Кроме того, есть иной вариант, где приоритет отдается анализу кала на наличие антигенов Helicobacter pylori.

Исследование крови на наличие антител к бактерии является информативным методом при первичной диагностике перед началом терапии и является наиболее распространенным методом диагностики. Согласно рекомендациям, наиболее предпочтительным является проведение анализа крови на определение антител класса IgG. Однако при обследовании пациентов, которые не получали лечение от бактерий Helicobacter pylori или принимают антибиотики/ингибиторы протонной помпы, наиболее информативным является диагностирование антител IgG методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Антитела класса IgA обычно обнаруживаются вскоре после инфицирования и могут использоваться для оценки активности воспалительного процесса, в то время как количество антител IgM может изменяться в зависимости от стадии заболевания. Диагностика методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет точно определить наличие Helicobacter pylori в различных формах.

Повторное тестирование на наличие Helicobacter pylori

Повторное тестирование на наличие Helicobacter pylori является крайне важным элементом лечения данной инфекции, учитывая ее высокую способность к восстановлению после проведенной терапии или в случае некачественно проведенной медикаментозного лечения.

Повторное тестирование на наличие Helicobacter pylori обычно рекомендуется в следующих случаях:

• После завершения курса лечения. В случае окончания терапии наличие бактерии может быть проверено, дабы оценить эффективность лечения и подтвердить исчезновение инфекции.
• В случае сохранения патологической симптоматики. Если у человека сохраняются симптомы, связанные с инфекцией Helicobacter pylori, (диспепсия, эпигастральная боль, дискомфорт в желудке и т.д.), врач может рекомендовать повторное тестирование для проверки наличия инфекции.
• В случае рецидива заболевания и повторного обсеменения болезнетворными бактериями. Если происходит рецидив инфекции, после завершения успешного курса лечения, может быть проведено повторное тестирование для подтверждения реинфекции или сохранения бактерий в просвете ЖКТ.

Обычно повторное тестирование проводится через 4-6 недель после завершения курса лечения, чтобы дать организму время избавиться от бактерии и оценить эффективность терапии.

Расшифровка результатов анализов Helicobacter pylori

Только врач имеет квалификацию и знания для интерпретации результатов анализов на Helicobacter pylori, устанавливать окончательный диагноз и назначать соответствующее лечение. Однако изучив бланк с результатами, некоторые выводы можно сделать и самостоятельно.

Результаты могут быть следующими:

• Анализ кала на Хеликобактер – это качественное исследование, в его результатах могут быть указаны только 2 варианта: «отрицательный» или «положительный» результат. Если результат отрицательный, это означает, что бактерия не обнаружена, а положительный результат указывает на наличие заболевания в данный момент или указывает на инфицирование в прошлом. Результаты этого анализа доступны сразу на следующий день после сдачи.
• Анализ крови на Хеликобактер производится методом ИФА. Анализ методом ИФА на наличие иммуноглобулинов IgG, IgM и IgA представляет собой полуколичественный метод. Пробу крови пациента разбавляют в различных концентрациях с раствором (1:2, 1:10, 1:400). Затем определяют количество антител и сравнивают с образцом. Если количество иммуноглобулинов меньше, чем в образце, результат считается отрицательным; если больше – положительным. Если количество антител почти совпадает с образцом, результат считается сомнительным. Оценка уровня иммуноглобулинов каждого типа проводится отдельно и в совокупности.
  • Анализ на наличие IgG: положительный – ≥ 1,1 Ед/мл, отрицательный – < 0,9 Ед/мл, сомнительный – 0,9–1,1 Ед/мл.
  • Анализ на наличие IgA: положительный – ≥ 1,1 Ед/мл, отрицательный – < 0,9 Ед/мл, сомнительный – 0,9–1,1 Ед/мл.
  • Анализ на наличие IgM: положительный – ≥ 40 Ед/мл, отрицательный – < 36 Ед/мл, сомнительный – 36–40 Ед/мл.
• Анализ крови методикой Вестерн-блот – это относительно не распространенное исследование (из-за его высокой сложности) требует много времени на проведение (до шести дней), а также имеет более высокую стоимость, чем стандартное ИФА. В результате вестерн-блоттинга выявляется наличие и интенсивность полос тест-системы, указывающих на присутствие антител класса IgA к различным антигенам Helicobacter pylori. Результат вестерн-блоттинга может быть интерпретирован как «отрицательный», «положительный» или «неопределенный». Положительный результат свидетельствует о наличии инфекции. Отрицательный результат указывает на отсутствие антител и инфекции или на ремиссию. При получении сомнительного результата рекомендуется повторить вестерн-блоттинг через 10-14 дней.
• Дыхательный уреазный тест на Хеликобактер. Первую порцию выдыхаемого воздуха пациент сдает через 5 минут после приема 200 мл апельсинового или яблочного сока в специальный герметичный контейнер. Затем пациент выпивает приготовленный медицинским персоналом раствор с 13С- меченой мочевиной. В течение 30 минут пациент спокойно сидит в медицинском офисе, строго через 30 минут после приема раствора проводят сбор выдыхаемого воздуха во второй контейнер. В дальнейшем происходит оценка уреазного теста в пробах до и после приема раствора препарата (обозначается как DOB - Delta over Baseline, измеряется в промилле.
  • <3,0 – отрицательный тест
  • 3,0-4,5 – сомнительный
  • >4,5 – положительный

Описанные неинвазивные лабораторные методы анализа наличия Helicobacter pylori отличаются своей точностью и позволяют гастроэнтерологам объективно оценить клиническую ситуацию.